近日,我所宠物疫病防控科技创新团队利用反向遗传技术,在国际首次成功构建了猫细小病毒和猪细小病毒的感染性克隆,建立了一种快速构建猪细小病毒全长感染性克隆的方法。
近年来,猪细小病毒 (Porcine parvovirus,PPV) 感染呈扩大上升趋势,给全球养猪业造成了巨大的经济损失。PPV是引起猪繁殖障碍的主要病原之一,PPV感染的主要对象是孕猪,特别是怀孕前的初产母猪,能够引起怀孕母猪流产、产死胎、胎儿木乃伊化等,而母体通常缺乏临诊症状,此外也会引起其他症状。
该团队利用人工基因合成的方法将PPV (BQ分离株) 构建到改造后的pBlueScript II SK(+) 载体上。其次,利用PCR扩增PPV基因组的中间编码区序列,并进行同义突变 ,形成EcoRv酶切位点。通过无缝克隆技术,构建成pPPV质粒。验证后进行感染性克隆病毒的拯救,最终成功拯救出包含PPV全基因组 (携带遗传标记 EcoRv) 的感染性克隆病毒。
该研究为今后细小病毒疫苗的研发提供了很好的载体平台。同时也为其它细小病毒成员全基因组的构建提供了思路,开拓了一条新的途径。
猪细小病毒的感染性克隆的相关研究成果在线发表在《病毒学文献(Archives of Virology》。