牛结核病是一种人兽共患慢性传染病,危害严重,其不仅可感染动物,而且人可以通过吸入含菌气溶胶或食用未经巴氏消毒的牛奶受到感染。灵敏、快速、特异的检测技术是牛结核病防控及净化的关键。IFN-γ释放试验(IFN-γ release assay,IGRA)是基于细胞免疫建立的牛结核病检测方法。结核病阴性牛淋巴细胞经牛型提纯结核菌素(PPD B)刺激后不产生IFN-γ,结核病阳性牛淋巴细胞经PPD B刺激后,产生大量IFN-γ。通过建立经PPD B刺激后的待检牛全血中IFN-γ的ELISA方法,从而实现对牛结核病的准确、快速和高通量检测。该方法具有敏感性好、特异性高、结果客观,且可以在短期内进行重复检测的优点,目前已被美国、新西兰、澳大利亚和西班牙等国家批准用于牛结核病检测,并被OIE推荐为牛结核病的诊断方法。
采用单抗夹心原理,经优化而建立的牛结核病IFN-γ夹心ELISA检测试剂盒敏感性和特异性高,与经典皮内变态反应检测(TST)的符合率为96.2%,与进口试剂盒符合率为97.3%;与TST的特异性为97.2%,相对于进口试剂盒的特异性为96.5%,相对于进口试剂盒和TST共阴性样品的特异性为98.57%。本试剂盒采取了一些特殊技术,背景控制非常好,阴阳性结果差距明显,可用于奶牛、肉牛等品种,适用于不同日龄的牛。该制品是我国研发的具有自主知识产权的新制品,可完全替代进口试剂盒,已经取得国家二类新兽药证书,将使我国在牛结核病快速和高通量诊断技术方面完全摆脱了国际垄断。
技术完成人:朱鸿飞,研究员,博士生导师,兽医公共卫生安全与管理团队首席科学家。主要从事外来病、畜禽重大疫病新型诊断技术、新型疫苗研制及综合防控技术研究。
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